宋教仁被暗杀后，李烈钧与湖南都督谭延闿、广东都督胡汉民、安徽都督柏文蔚通电反袁。
1913年7月12日，在江西湖口成立讨袁军总司令部，李烈钧就任总司令，揭开二次革命的战幕，8月失败后，流亡日本。
1915年12月12日，袁世凯宣布接受帝位，推翻共和，复辟帝制，改中华民国为“中华帝国”，并下令废除民国纪元，改民国五年1916为洪宪元年，史称洪宪帝制。
李烈钧反对袁世凯复辟帝制，捍卫共和体制，提出“宁做自由鬼，不做专权奴”，他从南洋紧急赶回了国内，准备进行二次讨袁。
1915年12月25日，他和蔡锷、唐继尧在云南组织“护国军”，开始“护国战争”，蔡锷任第一军总司令，出兵四川；李烈钧任第二军总司令，进军两广；唐继尧任第三军总司令，坐镇云南。
1916年3月23日，袁世凯下令恢复民国年号，当了63天的皇帝后，黯然退位，6月6日，袁世凯因尿毒症去世，继任总统黎元洪，宣布恢复临时约法和国会，护国战争结束。
1917年后，李烈钧两次在孙中山广州所组的南方政府，担任总参谋长，辅佐孙中山打败陈炯明。
1927年初，李烈钧被蒋介石任命为江西省政府主席，任南京国民政府常委兼军事委员会常委。
1931年“九一八事变”后，李烈钧致电蒋介石，主张尊重言论自由，改良政治，一致抗日。
李烈钧有七子三女，抗战爆发后，当时李烈钧的大儿子在学医，小儿子才4岁，为支持抗日，他将身边达到服役年龄的五个儿子全都送入军队，两个在黄埔军校，一个在海军学校，两个远赴缅甸，参加中国远征军，当时媒体广为报道，称之为“党国元老，五子从戎”。
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